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　　1、配料：配方换算→在容器中加入少量水→按照配方称取各种药品→加足所需水量。

 

　　2、溶解：

　　淀粉溶解：少量冷水调成糊状

　　加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95～97℃，且需要边

　　加热边搅拌以防止烧焦。

 

　　3、调pH：用1N的盐酸或的1NNaOH把培养基调节到所要求的值。

 

　　4、过滤：滤纸或棉花进行过滤。

 

　　5、分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

 

　　6、包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

 

　　7、灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

 

　　8、摆斜面：灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

 

　　9、贮存：培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

 

　　Gibco液体培养基的操作步骤：

　　1、准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

 

　　2、校正ph值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度。

 

　　3、过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

 

　　4、分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内，塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备。

 

　　5、培养基的，常用高压蒸汽法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽才能达到的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽比干热法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸取水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。